细胞凋亡（Apoptosis）是一种经过精确定义的程序化细胞死亡过程，区别于细胞坏死（Necrosis）。它是一种有序的、基因调控的主动细胞死亡形式，广泛参与生物体的发育、组织稳态的维持、免疫系统的调节以及各种疾病的发展。凋亡的显著特征包括细胞体积缩小、膜的完整性被保留但出现泡状突起、染色质的凝聚及DNA的片段化等。

凋亡机制

在凋亡过程中，许多关键蛋白参与其中，尤其是Caspase家族的成员，如Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9，这些蛋白在执行细胞凋亡中发挥基础性作用。Bcl-2家族蛋白也在这一过程中扮演重要角色，它们通过调节线粒体外膜的通透性来控制细胞色素c的释放，从而启动Caspase级联反应。而p53蛋白则是DNA损伤应答的核心，通过转录调控下游基因如Bax和PUMA，促进凋亡发生。

诱导方式

常见的细胞凋亡诱导方式可分为生物学诱导和化学物质诱导两大类。生物学诱导通常通过细胞表面受体与配体的结合来激活凋亡信号通路，例如Fas受体与Fas配体结合，触发外源性凋亡路径。化学诱导则是通过化学药物直接作用于细胞内部相关关键蛋白或信号通路，例如使用星形孢菌素、MG-132、过氧化氢等药物来损害DNA、干扰细胞周期和破坏线粒体功能，从而促发细胞凋亡。

实验方案

在本文中，我们将分享在Jurkat细胞中使用抗Fas受体（抗CD95）单克隆抗体诱导细胞凋亡的一般方案。我们的小鼠单克隆抗Fas抗体（Ab006530）将作为凋亡指征的辅助工具。实验步骤如下：

1. 在37°C、含5% CO2的培养箱中，将Jurkat细胞置于RPMI-1640中，培养基中添加10%胎牛血清（FBS）。
2. 以300-350× g的速度离心5分钟，使用新鲜培养基重悬细胞沉淀，最终浓度调至5×105细胞/mL。
3. 将抗Fas（抗CD95）mAb添加至合适浓度，37°C的培养箱中孵育2-4小时，抗Fas/CD95的推荐终浓度为2-20 mg/mL。
4. 再以300-350× g离心5分钟收获细胞。
5. 去除所有培养基，用PBS重悬细胞。
6. 重复以上步骤，重悬至最终浓度为15×106细胞/mL。
7. 检测细胞凋亡情况，收集细胞并选择合适的检验方法。

化学物质诱导

使用细胞凋亡诱导剂可以通过多种机制作用于与凋亡相关的蛋白，促进凋亡的发生。选择不同的试剂和浓度，检测时间可以设定为处理后8-72小时。必须强调的是，不同的细胞系可能需要不同的凋亡诱导剂，而处理的时间应根据细胞类型和实验目的而定。

作为在生物医学领域的研究机构之一，尊龙凯时人生就博致力于推动细胞凋亡及相关机制的探索和应用，通过科学研究为健康和医学发展做出贡献。