NLRP4E是核苷酸结合寡聚化结构域、富亮氨酸重复序列及含pyrin结构域(NLRP)家族的重要成员,具有调节病理生理过程的能力,被誉为“雌性生育因子”之一,同时也是卵母细胞减数分裂中不可或缺的典型母体因子。其通过调节关键的肌动蛋白帽蛋白类固醇受体共激活因子(SRC)和细胞分裂控制蛋白42同源物(CDC42)在卵母细胞减数分裂中发挥重要作用。此外,NLRP4E还被认为是蛋白皮层下母体复合体(SCMC)的新亚基。有研究表明NLRP4E在着床前胚胎发育中至关重要,但其在卵母细胞减数分裂中的具体功能及调控机制仍有待进一步探索。深入研究NLRP4E有望揭示其在生殖过程中的广泛作用及潜在应用价值。
安徽医科大学第一医院的张东教授课题组通过构建NLRP4E基因敲除卵母细胞模型,结合分子生物学、活细胞成像及蛋白质组学等先进技术,全面探讨了NLRP4E在卵母细胞减数分裂中通过SRC及CDC42调控肌动蛋白帽形成的具体分子机制。这为生殖调控网络的研究及生殖障碍治疗目标的开发提供了重要依据。值得一提的是,研究依赖于精确的蛋白质互作分析,百泰派克生物科技与安徽医科大学课题组紧密合作,使用ThermoFisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台及nanoLC-MS/MS纳升色谱技术,为Co-IP蛋白互作分析提供高效、精准的服务,保障了数据的准确性与可靠性,从而推动研究的深入发展。
尊龙凯时人生就博致力于为生物医疗领域提供优质的解决方案。为了探讨NLRP4E的功能,研究团队首先建立了以雌性小鼠卵母细胞为研究对象的细胞模型。通过体外培养卵母细胞至减数分裂阶段,模拟其自然发育过程,确保实验模型的可靠性。其次,利用基因敲低/敲除技术深入研究NLRP4E在卵母细胞中的作用,并通过对比分析NLRP4E缺失模型与正常模型的差异,进一步探讨其对减数分裂的影响。
免疫荧光染色结合共聚焦显微镜的运用,使得研究团队可以精准定位和检测NLRP4E、SRC、CDC42及肌动蛋白等相关蛋白在卵母细胞中的表达情况。同时,通过免疫共沉淀(Co-IP)技术分析NLRP4E与SRC、CDC42等蛋白的相互作用,验证其潜在的关联性。在这一过程中,百泰派克生物科技提供了技术支持,保障了高效的蛋白互作分析,为研究的进展提供了助力。
研究结果表明,NLRP4E在卵母细胞中是一种优势蛋白,且其敲低会显著影响卵母细胞的减数分裂及质量。NLRP4E的缺失会导致染色体异位和纺锤体严重紊乱,损害卵母细胞的功能。此外,NLRP4E通过其特有的S429和T430位点磷酸化被激活,并在肌动蛋白帽区聚集,调节其形成与动力学。研究发现,关键的磷酸化过程涉及GRIN1和GNAO1,这些蛋白激活NLRP4E,进而调节SRC和CDC42的功能,促进肌动蛋白帽的组装。
通过对NLRP4E与SRC相互作用的进一步分析,结果表明,注射SRC-mRNA可以挽救NLRP4E敲低导致的帽的形成缺陷,显示SRC在这一过程中的重要性。这一发现为深入理解卵母细胞减数分裂的精细调控机制提供了新思路,也为相关生殖疾病的研究提供了理论依据。
为了进一步探涯NLRP4E及其复杂的调控网络,精准的蛋白质组学分析至关重要。百泰派克生物科技凭借专业团队和多重质量控制平台,致力于为研究人员提供先进的Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析服务。该公司遵循国际法规与标准,不仅能满足基础研究的高要求,还为广大科研工作者提供定制化的服务。欢迎随时与尊龙凯时人生就博的技术支持团队沟通,以获取更多专业的生物医疗服务。