在生物制药生产中，单克隆细胞株的开发是至关重要的一环，尤其是在单克隆抗体的制备过程中。为了保证产品的一致性，使用的细胞株必须源自于单个细胞。然而，传统的克隆工作流程常常依赖于单细胞克隆的有限稀释法或流式细胞术，这些方法无法有效验证是否仅分配了一个细胞，导致单克隆性的确认过于依赖于孔板成像的准确性。孔板成像存在固有的误差，同时需要离心操作来确保细胞的聚集在成像焦平面上。这些误差的累积，降低了在特定工作流程中实现单克隆性的可能性，因此，高精度的成像技术和检测方法变得尤为重要。

尊龙凯时人生就博的UPSIGHT20（影像式单细胞打印与成像系统）通过双重验证机制，有效地解决了细胞分配中的挑战。设备首先通过喷嘴图像记录单细胞的分离情况，其次使用3D全孔成像技术直接捕获液体体积的图像。这种3D成像方式能够完整捕捉液体体积，消除了克隆后所需的离心操作。同时，UPSIGHT20支持菌落生长后的实时监测，兼容96、384和1536孔板，适用于高通量工作流程，其单细胞分配效率超过98%。

实验分析表明，结合喷嘴图像与3D全孔成像，细胞株的单克隆性概率超过9999%，且无需依赖荧光染色或成像技术。UPSIGHT20为克隆、验证和追踪提供了一整套完整的工作流程。流程的第一步是将细胞悬浮液加载到一次性墨盒中。在单细胞分配过程中，喷嘴生成微型自由飞行液滴并持续进行成像。图像处理算法实时评估液滴，判断是否包含0、1或多个细胞。如果液滴未成功区分，则会被丢弃，而如检测到单个符合标准的细胞，则将其分配至孔板中。系统为每个成功分配的细胞生成五张图像，以确认单细胞的分离与排出情况。分配完成后，通过孔板下方的相机进行3D全孔成像，确保分配的单细胞得到二次验证。

在克隆后的阶段，UPSIGHT20能够对具有理想生长曲线的特定克隆进行成像和追踪其群体生长。这种全孔成像技术的引入提升了细胞检测的准确性，避免了传统方法中由于仅在孔底进行成像而导致的畸变影响。UPSIGHT20的快速高效成像过程，使得在384孔板中仅需约3分钟即可完成处理，显著提高了高通量群体追踪的能力。

通过喷嘴图像与3D全孔成像的结合，UPSIGHT20在单细胞分配过程中提供了更可靠的验证，相比传统方法其单细胞分配效率超过98%。澄清细胞群体是否为单克隆目标，3D全孔成像进一步提供验证，确保仅有单个细胞被分配。在评估中，我们发现喷嘴图像与3D全孔成像结合的方法，可提供全面的细胞分布分析，比一般方法更具优势。

最终结果表明，UPSIGHT20实现了超过9999%的单克隆性概率，且在成像速度上大幅提升。这种创新技术不仅提高了生物医学领域单细胞研究的准确性和效率，还为细胞生物学的未来研究提供了强有力的工具支持。尊龙凯时人生就博相信，这项技术将推动细胞研究的发展，为深入理解细胞行为与特性奠定基础。